MIKROBIOLÓGIAI DIAGNOSZTIKA I.

THE PUBLIC HEALTH CHALLENGE OF INFECTION AND COMMUNICABLE DISEASE

Brian I Duerden BSc MD FRCPath

Professor of Medical Microbiology, University of Wales College of Medicine, Cardiff and Deputy Director (Medical Director), Public Health Laboratory Service, London, UK

After 150 years of the science of microbiology and the study of infection, and 60 years of the antibiotic era, infection remains a major challenge to individual and public health. Many classical infections diseases remain uncontrolled, e.g., diarrhoeal infections (in developing countries), influenza, pneumonia and meningitis (world-wide), Others re-emerge when control measures are neglected (measles, diphtheria, and tuberculosis) and the increasing incidence of antibiotic resistance threatens our ability to treat life-threatening infections. Modern life styles, including food production and catering practices, create new opportunities for disease to spread by food and water, and modern travel means that infections can spread rapidly worldwide. Modem medical practice depends on effective treatment and prevention of infection, and also creates increasing numbers of compromised and susceptible patients. Microbial and human ecology are dynamic and new infectious diseases will continue to emerge beyond AIDS, H. pylori and Hantaviruses. There is also a growing realisation that chronic and supposedly "non-infectious" diseases such as cancers and heart disease may have long-term infective components. We must rise to the public health challenge by improved prevention through education, vaccines and infection control measures (hospital and community), better detection through improved diagnostics and expanded screening programmes, and conservation of precious treatment resources - antibiotics and antivirals.

INTERPRETATION OF LABORATORY RESULTS IN CLINICAL MICROBIOLOGY AND ITS ATTITUDE TOWARDS THE CONCEPT OF LABORATORY MEDICINE

Josef Scharfen, MD, PhD, president of the Society of Medical Microbiology of the Czech Medical Association of Jan Evangelist Purkyné, Prague

Department of Medical Microbiology and Immunology, State Regional Hospital Trutnov, Czech Republic.

The concept of laboratory medicine is based on high centralisation of technology mainly on economical premises. It can be introduced usually in newly built hospitals, but sometimes the microbiological laboratories are forced to be implemented to biochemical complex (departments) not only in the technological sense but in a mental sense, too. The disadvantage of this concept might be a breaking up of the borders of clinical laboratory branches in technology without correct interpretation of the results, which is dangerous for optimal complex solution of infectious processes.

The consequences of these practices solutions are not only in the technological area but as a feed back in the highly theoretical areas as are a pre and postgraduate teaching of medical microbiology, which can be reduced only to laboratory technology study common to other laboratory branches.

It should be stressed, that infectious diseases are the result of complex interaction of micro- and macroorganism and that the main part of the work of clinical microbiologist is interpretation of this process on the basis of the results of laboratory technology. The intention of this future interpretation must be used from the beginning of the sampling of clinical material and processing the sample in the laboratory to the end of this process. The work of clinical microbiologist comprises such areas as the differential diagnostics, indication of the sampling of clinical material, technological part of analysis, interpretation of the results, proposal of the therapy, with consultation of antibiotic therapy or immunomodulation, and the consulting of the data of epidemiological importance in the community and the hospital.

Most important for this process is the effective interactive and selective communication between the clinician and clinical microbiologist, who must be clinically educated medical specialist in clinical microbiology. This type of communication needs a high degree decentralisation of laboratory methods, because it needs intimate knowledge of local environment and it stimulates not only a dialogue in the space between technology and clinical medicine but is an important condition of securing a validity of the samples coming to microbiological analyses.

These problems could be seen during working up of clinical standards of diagnostics and treatment of the diseases and syndromes with microbial aetiology (bacteria, viruses, parasites, fungi), if these standards are consulted with clinical microbiologists. It could be seen, that it is not only the question of clinical standard on one side and Standard operation procedure as a part of GLP in clinical microbiology laboratory on the other side, but that it could be effectively performed only with the shared pool of information, which is used for interactive and selective communication between clinician (practitioner or clinical specialist) and clinical microbiologist.

This communication is most effectively realised in highly decentralised way between a specialised clinical microbiology laboratory and the clinical partners on the ground of the respective institution, best of all, at the bedside of the patient, or between personally known partners. It comprises the same important areas as a technological background and the empirical base e.g. the opinion of both partners in theoretical and practical modelling of the real situation of the infectious process.

EXPERIENCE WITH A NEW AUTOMATED MICROBIOLOGY SYSTEM IN A CLINICAL SETTING

Maria G. Menozzi

University of Parma, Italy

Előadás kivonat nem érkezett.

A HPV MOLEKULÁRIS BIOLÓGIAI DIAGNOSZTIKÁJÁNAK AKTUÁLIS KÉRDÉSEI - PCR VAGY AMIT AKARTOK

Jeney, Cs.1, Takács, T.1, Sellyei, M.2, Veress, B.2, Szőke, M.1, Tisza, T.1, Hernold, L.1

1H-MED Diagnosztikai és Kutató Laboratórium, MH Központi Honvédkórház
2Patholab Bt.

Az utóbbi években a humán papillómavírus diagnosztikája, a molekuláris biológiai diagnosztikai módszerek megjelenésével, forradalmi változáson esett át. Azonban ezen módszerek alapos összehasonlítása mindez ideig váratott magára.

Vizsgálatunkban a laboratóriumunkba érkezett minták közül, 200 véletlenszerűen kiválasztott mintát vontunk be és vizsgáltuk a Digene Hybrid Capture II tesztjének és a H-MED L1-PCR tesztjének specificitását egy gold standard módszerhez (direkt szekvenálás) hasonlítva.

Az eredmények alátámasztják a tesztek megbízhatóságát, azonban felvetnek kisebb diszkrepanciákat is, amik felvázolják a fejlesztések követendő irányait is.

PCR ÉS A MOLEKULÁRIS GENETIKA MÓDSZEREI A TBC DIAGNOSZTIKÁBAN

Ködmön Csaba, Somoskövi Ákos

A tuberkulózis manapság világméretű problémát jelent az igazolt 1,7 millió Mycobacterium tuberculosis fertőzéssel. Továbbá az utóbbi évtizedben a fertőzések száma jelentősen nőtt Európában és az Egyesült Államokban, legfőképpen a magas rizikójú csoportokban, mint a HIV fertőzöttek, krónikus alkoholisták, kábítószerfüggők. Tovább súlyosbítja a helyzetet, hogy számos országban nincs megfelelő program a megbetegedés megfékezésére és, hogy az utóbbi években jelentősen nőtt a rezisztens M. tuberculosis törzsek száma valamint nőtt azon Mycobacterium fajok száma, melyek emberben is képesek megbetegedést okozni. Eszenciális eleme a TBC elleni küzdelemnek a gyors, szenzitív és specifikus kimutatása a kórokozónak. Hagyományosan a diagnózist a klinikai tünetek, a radiológiai kép, tuberculin teszt, a köpet mikroszkópos vizsgálata, valamint tenyésztés alapján állították fel. A felsorolt módszereknek számos hátránya van, melyek az alacsony specifitásban és szenzitivitásban, valamint tenyésztéseknél az időigényességben nyilvánulnak meg Ezen hátrányok elkerülésére kínálnak megoldást a nukleinsav alapú diagnosztikai eljárások, mint a PCR (polimeráz láncreakció), RFLP (restrikciós fragmenthossz polimorfizmus) és a DNS chip technológia, melyek magas fokú szenzitivitással és specificitással bírnak, valamint 12-24 óra alatt elvégezhetőek.

BETEGEINK HEPATITIS C VÍRUS SZEROTÍPUS ÉS GENOTÍPUS ANALÍZISE

Gervain Judit, Papp Istvánné, Szabóné B. Katalin1

1I.sz Belgyógyászat, Víruslaboratórium Szent György Kórház, Székesfehérvár

Bevezetés:
A hepatitis C vírus nagy variábilitása ismert. A vírus szerkezeti elemzésekor a különböző földrajzi területeken az egyes típusok- között jelentős nukleotid szekvencia eltérés található. A core, Ei, NS4, NSS régió analízise alapján 11 típust és kb. 70 szubtípust tudunk elkülöníteni. Ennek klinikai jelentősége a típusok eltérő pathogenitásában és az interferon terápiára adott válaszkészségükben van. Az interferon kezelés az 1/a, 2, 3, 5 típussal fertőzött egyénekben sokkal hatékonyabb, mint az 1/b vagy a 4-es típus esetén.

Célkitűzés:
Magyarországon ezideig nem vizsgálták a fertőzött beteganyag C vírus genotípus megoszlását. Laboratóriumunkban 1996 óta szerotípus vizsgálattal a 6 fő típust (1-6) tudtuk differenciálni. Előadásunkban az interferonnal kezelt betegeink szero- és genotpizálásának módszertanát és a kapott eredményeket mutatjuk be.

Módszer, betegek:
HCV Serotyping 16 Assay (Murex), Reverz PCR (Roche Amplicor), INNO-LiPA HCV II (Innogenetics). 100 (52 nő, 48 ffi) krónikus hepatitises beteg kezelés előtti savójának vizsgálatát végeztük.

Eredmény:
Szerotípus megoszlás: 76% 1 típus,9% dominálóan + kis 2, 3, 4es típus, 2% 4-es típus, 13% nem tipizálható. Genotípus megoszlás: 3% tiszta lb, 7% 1/a szubtípus, 10% kevert típus (1/a, 2/b, 2/c, 4).

Következtetés:
Betegeink közel 90%-a lb típusú C vírussal fertőzött. Ennek alapján érthető, hogy a magyarországi betegek csupán 20-35% lesz véglegesen gyógyult az interferon monoterápia illetve interferon + ribavirin kombinációs kezelés hatására. Folyamatban vannak vizsgálataink, melyekkel tisztázni szeretnénk, hogy a terápiás válasz azonos szubtípusokon belül mennyire függ a vírus finomabb szerkezeti eltéréseitől.