ATHEROSCLEROSIS, THROMBOSIS I.

PERFORMANCE OF A POINT-OF-CARE cTnI ASSAY (AIO!) IN MONITOIRING MYOCARDIAL INFARCTION (MI) PATIENTS

Paivi Laitinen1, Kim Pettersson2, Virpi Leppanen2 and Kirsi Majamaa-Voltti1.

1Oulu University Hospital, Kajaanintie 50, FIN-90220 Oulu, Finland and
2Department of Biotechnology, Tykistökatu 6A, FIN-20520 Turku, Finland.

Early triage of suspected MI patients is of vital importance for patient care and health cost containment. Cardiac troponin assays rapidly gain support due to their high diagnostic specificity in detecting MI and myocardial damage. Troponin heterogeneity and instability has made harmonisation of cTnI immunoassays difficult. We report the performance of a new test (Aio!-TnI, Perkin Elmer, Wallac) designed to measure free, complexed and fragmented cTnI (detection lim<0,1 ng/ml, range 500 ng/ml) with that of two commercial tests (Abbott AxSym, Bayer ACS). The Aio! Assay provides quantitative results using whole blood, plasma or serum in 17 min.

Monitoring samples (serum and Li-heparin) were collected from 15 MI patients, aliquoted and frozen. The serum samples were assayed with the three assays, the plasma samples with the Aio! assay only. Correlation with the AxSym (r=0.96) and ACS (r=0.98) assays were good but Aio-cTnI measured approximately 11- and 3-fold lower concentrations, respectively. Serum and plasma samples correlated excellently with the Aio! Assay (r=0.99). Using MI cut-off concentrations provided by the manufacturers (preliminary Aio!-cut-off 0.2 ng/ml), there was virtually complete agreement in classifying all patient samples. The three assays despite disagreement in measured concentrations provided identical clinical interpretations. With the Aio! Assay, no sample required dilution.

C-REAKTÍV PROTEIN ÉS CORONARIA BETEGSÉG

Selmeci László

Ér- és Szívsebészeti Klinika, Semmelweis Egyetem Általános Orvostudományi Kar, Budapest

A C-reaktív protein (CRP) az akut fázis fehérjék csoportjába tartozik és vizsgálatát hosszŁ idő óta kiterjedten alkalmazzák a szisztémás gyulladásos folyamatok diagnosztikájában. A cut-off érték, amely fölött az emelkedést kórosnak tartjuk általában 10 mg/L. Ennél alacsonyabb értékek esetén, akut szisztémás gyulladásos folyamat jelenléte nagy valószínűséggel kizárható. Az utóbbi években a CRP meghatározást sikerült az eddigieknél jóval érzékenyebbé tenni és az Łgynevezett ultraszenzitív technikával ma már a detektálási határt 0,1 mg/L értékre szorították le az eddigi 2-5 mg/L-ről. Döntően e módszer elterjedésének köszönhető az a mindössze 5-6 évre visszatekintő felismerés, hogy az eddig teljesen normálisinak tartott 10 mg/L-es tartomány alatt is jelentős különbségek lehetnek a különböző egyének között. Azóta számos, kiterjedt populáción végzett prospektív klinikai vizsgálat adatai meggyőzően bizonyítják, hogy a CRP kisfokŁ emelkedése (>3 mg/L) független kockázati tényezőt jelent a coronaria betegség progressziója szempontjából. Ma már ezt a tesztet sok helyen alkalmazzák a kardiovaszkuláris kockázat megítélésére, illetve a már fennálló coronaria betegség várható progressziójának előre jelzésére. Mindezen adatok alapján egyértelmű összefüggés látszik a szervezetben lezajló gyulladásos folyamatok és a coronaria betegség között.

A TUMOR NECROSIS FACTOR-a ÉS A COMPLEMENT C4 FEHÉRJÉK POLIMORFIZMUSAINAK ELŐFORDULÁSA ÉS KAPCSOLTSÁGI ANALÍZISE CARDIOVASCULÁRIS BETEGEKBEN.

Szalai Csaba1, Füst György2, Duba Jenő3, Kramer Judit4, Prohászka Zoltán2, Romics László2, Császár Albert5

1Heim Pál Gyermekkórház Központi Laboratórium és MTA-SE Molekuláris Immunológiai Kutatócsoport Budapest
2Semmelweiss Egyetem (SE) ÁOK, III.sz Belklinika Budapest
3Kardiológiai Intézet Budapest
4Szt. János Kórház Budapest
5SE Egészségtudományi Kar, I. sz Belklinika Budapest

Számos tény bizonyítja, hogy a cardiovascularis betegségek (CVB) kialakulásában a tumor necrosis factor-a (TNF-a), és a complementrendszer fontos szerepet játszanak. Vizsgálatainkban azt tanulmányoztuk, hogy ezen rendszerek genetikai polimorfizmusai befolyásolják-e a CVB-re való hajlamot. 320 coronaria bypass műtéten átesett betegen és 248 kontroll személyen a következő polimorfizmusok gyakoriságát határoztuk meg: TNF-a-308A és -238A, valamint complement C4A és C4B. A C4B*Q0 allél homozigóta hordozói szignifikánsan gyakrabban fordultak elő betegekben, mint a kontroll csoportban (4,4 vs. 1,2%; p=0.02; odds ratio (OR)=3.8 (1.2-13.2). Genetikai kapcsoltságot találtunk betegekben az egymástól 300 kb-ra, az MHC locuson levő TNF-a-308A és a C4A*Q0 allélok, valamint a TNF-a-238A és a C4A*6 allélok között. Ez a kapcsoltság a kontrollokban nem volt megtalálható. A TNF-a-308A+C4A*Q0 allélasszociáció szignifikánsan gyakrabban. fordult elő CVB betegekben, mint a kontrollokban (6,8 vs. 3,0%; p=0.002; OR=2.4 (1.3-4.3)). A különbség még jelentősebb volt ha azokat a betegeket hasonlítottuk össze a kontrollokkal akiknek preoperatív myocardialis infarctusuk volt (8,9 vs. 3,0%; p=0.0003; OR=3.1 (1.6-5.9)). A TNF-a-238A+C4A*6 allélasszociáció is gyakrabban fordult elő a betegekben, mint a kontrollokban (3,0 vs. 0,8%; p=0.002; OR=4.0(1.5-10.6)). Eredményeink alapján a C4B*Q0 homozigóta állapot és a TNF-a-308A+C4A*Q0, valamint a TNF-a-238A+C4A*6 allélkombinációk fokozott kockázati tényezőt jelentenek CVB kialakulására. A TNF-a-308A+C4A*Q0 allélasszociáció vizsgálataink alapján jelentősen növeli a myocardialis infarctus kockázatát.

THE EFFECTS OF IN VITRO PLATELET ACTIVATION ON PLATELET DERIVED NITRIC OXIDE (NO) PRODUCTION IN HEALTHY HUMANS AS WELL AS IN CHRONIC MYELOPROLIFERATIVE DISORDERS WITH ELEVATED PLATELET COUNTS

M. Huszka, E. Jenei, M. Kaplar, L Rejto and M. Udvardy ,

University of Debrecen, Medical and Health Science Center, Faculty of Medicine, 2nd Department of Medicine

Introduction: Adhesion of platelets to the vessel wall is prevented, in part, by endothelial production of NO. Platelet derived NO - presumably provoked by platelet activation - may locally inhibit further platelet recruitment. However, the measurement of the minute amounts of the fairly rapid (seconds) platelet NO production seems to be extremely difficult. Chronic myeloproliferative disorders, associated with elevated platelet counts may simultaneously predispose to vascular occlusions and bleeding events (due to thrombocythemia and impaired platelet function). The aim of the present study was to assess in vitro platelet NO production using standard activating agents and to compare the results of the controls with the myeloproliferative cases.

Objectives and design: assessment of platelet NO production at baseline conditions and after activation by collagen, ADP, thrombin, epinephrine, ristomycin. Platelets were isolated from venous anticoagulated blood using repeated washing procedures. The control group consisted of 20 healthy volunteers, whereas the patient group comprised 15 cases. NO production was detected with NO sensitive electrode based method (ISO-NO WPI, Fl., US). NO production was calculated pro 100000 platelets. The electrical signal - pA - has been plotted against time. S-shaped curves were fitted to the points by the Hill equation, providing the parameters "Vmax" (characterising maximum NO production), "Km" (the time for reaching half maximum NO production) and area under curves has also been calculated.

Results: Reduced platelet NO responses were observed after ADP (NS), thrombin (p<0.0069) collagen (p<0.018), epinephrine (NS), ristomycin (p<0.002) in all the chronic myeloproliferative cases as opposed to the healthy control group. These alterations are mainly quantitative, the kinetic pattern (Km) of NO responses were identical in the two groups. If L-Arginine (L-NAME, etc.) antagonists were added to the reaction mixtures the responses were blocked by 90%.

Conclusions: the electrochemical method - even if tiresome - seems to be sensitive and feasible method to detect platelet NO production in vitro and ex vivo. Platelet NO production seems to be activator dependent and could have been well blocked by NO synthesis inhibitors. The platelet NO production following some clinically relevant stimulants are remarkably reduced in chronic myeloproliferative patients with elevated platelet counts. Further studies are necessary to elucidate and clarify the possible role of reduced in vitro/ex vivo platelet NO responses in chronic myeloproliferative diseases and correlate it to the so called thrombohemorrhagic and vascular complications frequently associated with these clinical conditions.

ATHEROSCLEROSIS ÉS ATHEROTHROMBOSIS KOCKÁZATI TÉNYEZŐINEK VIZSGÁLATA A CARDIOVASCULÁRIS BETEGSÉGEK KIALAKULÁSÁBAN

Kálmán Zsuzsa1, Gombos Zoltánné1, Víg Ágnes2

1XV. Ker. Önk. Eü. Int. Központi Laboratórium, Budapest
2Hetényi Géza Kórház, Szolnok

Az aminosav anyagcsere köztitermékeként ismert homocystein ma már a koleszterinnél is veszélyesebbnek tekintett rizikófaktor. Enzimatikus lebomlása B6, B12 vitaminoktól és folsavtól, mint kofaktoroktól függő folyamat.

A nem megfelelő táplálkozás, bizonyos betegségek (vitamin felszívódási zavar, idült veseelégtelenség, csökkent pajzsmirigy működés), egyes gyógyszerek befolyásolhatják a keletkező homocystein lebomlását.

A szerzett hyperhomocysteinémia hatására fellépő endothelialis diszfunkció atherosclerosishoz, a véralvadásra gyakorolt károsító hatás következtében csökkent protein C aktiváció, atherothrombosis kialakulásához vezet. Vizsgálatunkban ismert vaszkuláris érintettségű betegek és normál személyek vettek részt. Tapasztalatainkat a mért homocystein, folsav, B12 vitamin, koleszterin, triglicerid, HDL koleszterin lipoprotein elektroforézis, APC rezisztencia alapján összegezzük.